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發布日期:2024-11-25

PCR實驗是專門用來檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。PCR(Polymerase Chain Reaction)即 聚合酶鏈式反應,又稱無細胞分子克隆系統或體外酶促基因擴增法。是分子生物學研究和實驗的常規方法,也是生物學、醫學臨床等領域廣泛應用的實驗技術。PCR實驗又稱臨床基因擴增實驗,通過將病毒體內所含的基因進行擴增,即將微量的DNA大幅增加,以測出一些病毒含量不高的感染者體內是否含有特定的病毒。

一、實驗室布局形式

(一)分散式

    各實驗用房彼此相距較遠,呈分散布置形式。

    各實驗之間不易相互干擾。

    除各實驗室自身做好防護,防止外界環境對實驗造成影響外,其它無特殊條件要求。

(二)組合式

    完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,形成集中、獨立的實驗區域。

    每個實驗室應設置獨立緩沖間、實驗室間應設置帶消毒裝置的傳遞窗。
PCR實驗室裝修

二、實驗室功能房間主要功能和儀器配置清單

(一)試劑儲存和準備區

試劑的制備和貯存,試劑的分裝,主反應混合液的制備。儀器有2-8℃和-15℃冰箱、混勻器、微量加樣器(覆蓋1-1000ul)、移動紫外燈(近工作臺面)、消耗品:一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心)、專用工作服和工作鞋、專用辦公用品。

(二)試劑儲存和準備區

核酸(RNA、DNA)提取、貯存擴增反應管的制作。儀器有2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱、高速臺式冷凍離心機、混勻器、水浴箱或加熱模塊、微量加樣器(覆蓋1-1000ul)、可移動紫外燈(近工作臺面)、生物安全柜、一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心)、專用工作服和工作鞋、專用辦公用品、如需處理大分子DNA,應具有超聲波水浴儀。

(三)擴增反應混合物配置和擴增區

DNA或cDNA擴增。核酸擴增儀、微量加樣器(覆蓋1-1000ul)、可移動紫外燈(近工作臺面)、一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭(帶濾心)、專用工作服和工作鞋、專用辦公用品。

(四)擴增產物分析區

擴增片段的測定。視檢驗方法不同而定。基本儀器有微量加樣器(覆蓋1-1000ul)、可移動紫外燈(近工作臺面)、一次性手套、一次性吸水紙、加樣器吸頭(帶濾心)、專用工作服、工作鞋、專用辦公用品。

三、PCR實驗室通風與空調系統設計

(一)標準規范

《醫療機構臨床基因擴增檢驗實驗室工作導則》

《生物安全實驗室建筑技術規范》 GB50346-2011

《臨床基因擴增(PCR)檢驗實驗室規范》

(二)實驗室暖通設計參數
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(三)實驗室氣流流向設計

為避免交叉污染,PCR實驗室空氣流向必須嚴格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增反應混合物配制和擴增區→擴增產物分析區。氣流組織采用上送下排,送風口和排風口布置應使室內氣流停滯的空間降低到最小程度。在生物安全柜操作面或其他有氣溶膠操作地點的上方附近不得設送風口。高效過濾器排風口應設在室內被污染風險最高的區域,單向布置,不得有障礙。

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